Kas ir fluorescences filtrs?

Emisijas filtrs

Emisijas filtri kalpo tam, lai ļautu vēlamajai parauga fluorescencei sasniegt detektoru. Tie bloķē īsākus viļņu garumus, un tiem ir augsta pārraide garākiem viļņu garumiem. Filtra veids ir saistīts arī ar skaitli, piemēram, attēlā BA510IF (traucējumu barjeras filtrs), šis apzīmējums attiecas uz viļņa garumu 50% no tā maksimālās pārraides.

Tie paši ieteikumi ierosmes filtriem attiecas uz emisijas filtriem: minimālā pārraide, joslas platums, OD un CWL. Emisijas filtrs ar ideālu CWL, minimālo pārraidi un OD kombināciju nodrošina spilgtākos iespējamos attēlus ar visdziļāko iespējamo bloķēšanu un nodrošina vājāko emisijas signālu noteikšanu.

Dihroisks spogulis

Dihromiskais spogulis ir novietots starp ierosmes filtru un emisijas filtru 45° leņķī un atspoguļo ierosmes signālu fluorofora virzienā, vienlaikus raidot emisijas signālu uz detektoru. Ideāliem dihromiskajiem filtriem un staru kūļa sadalītājiem ir asas pārejas starp maksimālo atstarošanu un maksimālo caurlaidību ar >95% atstarošanu ierosmes filtra joslas platumam un pārraidi >90% emisijas filtra joslas platumam. Izvēlieties filtru, ņemot vērā fluorofora krustošanās viļņa garumu (λ), lai samazinātu izkliedēto gaismu un palielinātu fluorescējošā attēla signāla un trokšņa attiecību.

Dihromiskais spogulis šajā attēlā ir DM505, kas nosaukts tāpēc, ka 505 nanometri ir viļņa garums pie 50% no šī spoguļa maksimālās caurlaidības. Šī spoguļa caurlaidības līkne parāda augstu caurlaidību virs 505 nm, strauju caurlaidības samazināšanos pa kreisi no 505 nanometriem un maksimālo atstarošanos pa kreisi no 505 nanometriem, taču joprojām var būt neliela caurlaidība zem 505 nm.

Kāda ir atšķirība starp garās caurlaides un joslas caurlaides filtriem?

Fluorescences filtrus var iedalīt divos veidos: garās caurlaides (LP) un joslas caurlaides (BP).

Garās caurlaides filtri pārraida garus viļņu garumus un bloķē īsākos. Griezuma viļņa garums ir vērtība pie 50% no maksimālās pārraides, un visus viļņu garumus, kas ir virs nogriešanas, pārraida garās caurlaidības filtri. Tos bieži izmanto dihromiskajos spoguļos un emisijas filtros. Garās caurlaidības filtri ir jāizmanto, ja lietojumam nepieciešama maksimāla emisiju savākšana un kad spektrālā diskriminācija nav vēlama vai nepieciešama, kas parasti notiek zondēm, kas ģenerē vienu izstarojošu sugu paraugos ar salīdzinoši zemu fona autofluorescences līmeni.

Joslas caurlaides filtri pārraida tikai noteiktu viļņu garuma joslu un bloķē citus. Tie samazina šķērsrunu, ļaujot pārraidīt tikai spēcīgāko fluorofora emisijas spektra daļu, samazina autofluorescences troksni un tādējādi uzlabo signāla un trokšņa attiecību augsta fona autofluorescences paraugos, ko nevar piedāvāt garās caurlaidības filtri.

Cik fluorescences filtru komplektu veidu BestScope var nodrošināt?

Daži izplatīti filtru veidi ir zilie, zaļie un ultravioletie filtri. Kā parādīts tabulā.